白蚁菌圃的抗炎实验研究结果与分析

　　黑翅土白蚁的菌圃，由白蚁分泌物组成，早在明代李时珍的《本草纲目》中就已有记载。白蚁菌圃富含游离脂肪酸 ，并具有较好的抗炎免疫作用 。本文报道白蚁菌圃不同提取方法的抗炎效果。早在1857年,李时珍在《本草纲目》中就记述了白蚁是一种中药材:“白蚁即蚁之白者,一名熨,一名飞蚁.穴地而居蠢木而食,因湿营土,大为物害。初生为蚁嫁,至夏至遗卵,生翼而飞,则变黑色,寻亦陨死……”川.1983年出版的《中国药用动物志》又记述了家白蚁全体入药,有滋补强壮的功能‘幻.主治老年体衰、久病气血虚弱等。近年来还正在研究用白蚁作为抗癌药物‘召’,并受到有关方面的重视.黑翅土白蚁是典型的土栖白蚁,它能在土壤中栽培菌圃,以此作为栖息和摄食场所.它一般生活在无污染的山林、果园、竹林、水库堤坝的土壤中,间接地从土壤摄取所必需的金属元素,维持正常生命活动.本文分析黑翅土白蚁及其菌圃的必需金属元素组成,供开发利用参考.一、材料与方法 1.材料来派由衡州市白蚁防治研究所提供的三个黑翅土白蚁成年巢,分别采自简州市的十里丰林场、岩头林场,江山县的凤林乡. 2.方法活的蚁巢取出后,分别选出有翅繁殖蚁、工蚁和纯菌圃(即除去白蚁的菌圃),80℃烘烤至恒重.干样品磨成粗粉,即可制备样品,用原子吸收分光光度计测定.6期张贞华等:黑翅土白蚁及其菌国的9种必需金属元素组成。

 

　　白蚁菌圃的抗炎实验1 材料

 

　　1.1 药物及试剂 白蚁菌圃粉碎成粗粉，分别用水、90% 乙醇及乙酸乙酯依次回流提取。每种溶剂提取3次，合并3次滤液，蒸馏回收溶剂，最后得到三种提取物，浓缩成浸膏。使用时用蒸馏水配成相应浓度，乙醇和乙酸乙酯提取物则用0.5% 羧甲基纤维素钠配成混悬液。醋酸地塞米松(天津药业集团有限公司，批号031042);伊文思兰(进口分装，国药集团化学试剂有限公司)。

 

　　1.2 实验动物 昆明种小鼠体重l8—22 g;SD大鼠体重180—220 g，均雌雄各半，购于江西医学院实验动物中心。

 

　　白蚁菌圃的抗炎实验2 方法

 

　　2.1 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 小鼠112只，雌雄各半，按体重随机分为8组;空白对照组(生理盐水20 ml/kg)、阳性对照组(地塞米松mg/kg)、水提物组(45和22.5 kg)、乙醇提取物组(40和20 kg)、乙酸乙酯提取物组(23和kg)(下同)，分别ig给药，连续14天。末次给药后h，用乙醚轻度麻醉。在小鼠右耳两侧涂二甲苯0.02 ml/只为致炎耳，左耳不作任何处理为非致炎耳。4 h后将动物处死，剪下两耳，用直径8 mm的打孔器分别凿出相同部位相同大小的耳廓，用电子天平称重。以致炎耳廓重减去非致炎耳廓重的差值作为肿胀值。抑制率=(对照组耳肿胀度一用药组耳肿胀度)/对照组耳肿胀度×100% 。数据采用组间T检验(下同)。

 

　　2.2 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 小鼠160只，雌雄各半，分组与给药剂量同上。末次给药1 h后，各组于尾静脉注射0.5%伊文思兰10g(体重)，并立即腹腔注射0.6% 的冰醋酸ml/10g后颈椎脱臼处死。腹腔注射5 ml生理盐水，轻柔，再剪开一小口，用吸管吸出洗液(如有出血则弃去不用)。再以3000 rpm离心12～15 min，取上清液于722分光光度计590 nm波长测吸光度。

 

　　2.3 对大鼠棉球植入所致的肉芽肿的影响 取180～220 g，SD大鼠112只，雌雄各半。手术前一天将大鼠按体重、性别随机分为8组，分别给相应的药物(剂量同2.1项)。第二次给药后乙醚麻醉，在大鼠两侧腋窝下剪开约1 cm的小口，将两个灭菌棉球(每个棉球重50±1 mg。高压灭菌，各加入氯苄青霉素1 mg/0.5 ml，50℃烘箱烤干)分别植入皮下，缝合创口，并在创口局部涂以少量抗生素。第8次给药后颈椎脱臼处死，取出棉球，剥离附着的结缔组织，在60~C烤箱烘12 h后称重，减去原来棉球重量，即为肉芽肿净重，取两侧肉芽肿质量的均值。

 

　　2.4 对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响 小鼠只，按性别体重随机分为4组：乙醇提取物组kg)、乙酸乙酯提取物组(23 kg)、对照组(生理盐水20 ml/kg)、阳性对照组(地塞米松5 mg/kg)，连续给药10天。在末次给药前，于右足踝关节处划线作标记，在毛细管放大装置中测足的原始体积。给药1 h后，于右足皮下注射1% 角叉菜胶0.05 ml。

 

　　致炎后30 min、1 h、2 h、4 h测体积，并计算各组肿胀度。

 

　　白蚁菌圃的抗炎实验3 结果

 

　　3.1 三种提取物，对小鼠耳廓肿胀抑制作用以乙醇提取物高剂量组作用最为明显。

 

　　3.2 三个组分给药都有减轻小鼠毛细血管通透性的作用(P值都小于0.05)，且作用程度比较相似。

 

　　3.3 抑制棉球肉芽肿实验以乙酸乙酯提取物高剂量组的效果最为明显(P<0.01)，乙醇提取物高剂量组未出现明显的作用，其它各个剂量组效果相近，且都有显着作用(P<0.05)。

 

　　3.4 实验结果表明，白蚁菌圃两组提取物对角叉菜胶致小鼠足肿胀足跖肿胀均有抑制作用，对致炎2 h和4 h后的抑制作用有显着的统计学意义

 

　　白蚁菌圃的抗炎实验4 讨论

 

　　炎症是一种防御性反应，人类疾病中最为常见。

 

　　炎症的基本病理变化包括局部组织损伤、血管反应和组织增生，通常概括为局部组织的变质、渗出和增生。炎症依其病程可分为两大类：急性炎症和慢性炎症。本实验选取了二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸诱导的毛细血管通透及又菜胶致小鼠足肿胀的急性炎症模型和大鼠棉球肉芽肿的慢性炎症模型。实验结果表明白蚁菌圃对炎症中出现的变质渗出和增生都有较好的抑制作用。这与古文献所记载的“白蚁泥，主治恶疮肿毒” 相符合。有关白蚁菌圃的抗炎机制还有待进一步研究。